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Tuner(DE3) 感受態細胞

簡要描述:Tuner(DE3) 感受態細胞 保存條件:-80℃ 基因型F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm lacY1 (DE3)

  • 產品型號:ABG220-50
  • 產品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-03-27
  • 訪  問  量:402

詳細介紹

品牌Abnbio貨號ABG220-50
規格50X100ul供貨周期現貨
主要用途感受態細胞應用領域環保,食品/農產品,化工,生物產業,制藥/生物制藥

基因型

F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm lacY1 (DE3)


簡要說明

Tuner(DE3)菌株是BL21菌株的lacZY基因(半乳糖苷透性酶基因)突變株,此突變導致IPTG以均一速度進入體系中大腸桿菌的每個細胞,產生更加嚴格、均一的濃度依賴。此菌株用于高效表達克隆于含有噬菌體T7啟動子的表達載體(如pET系列)的基因。λ噬菌體DE3區含有T7噬菌體RNA聚合酶,該區整合于Tuner的染色體上,所以稱為Tuner(DE3),可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等質粒的蛋白表達。Tuner(DE3)感受態細胞由特殊工藝制作,經pUC19質粒檢測轉化效率達107cfu/μg。


操作說明

1、取100μl冰上融化的Tuner(DE3)感受態細胞,加入目的質粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。 

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養基,混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。


注意事項

1、感受態細胞最好在冰上融化。

2.混入質粒時應輕柔操作

3.轉化高濃度的質??上鄳獪p少最終用于涂板的菌量。

4.誘導時,IPTG濃度可選(0.1-40mM均可)。

5.為獲得需要量的蛋白,最佳誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優化。












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  • 公司傳真:4009005473
  • 郵箱:sale@abnbio.com

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